I. Genetické minimum - chromozómové choroby a ich diagnostika
Ďurovčíková Darina
Klinika lekárskej genetiky SZU a FNsP, Bratislava
Úvod
Genetické choroby vznikajú v dôsledku mutácii na úrovni génu, alebo väčšej časti genómu, v interakcii s exogénnymi faktormi. Výskyt geneticky podmienených patologických stavov ( tab.1), alebo predispozícia k nim sa podľa viacerých štatistík odhaduje na 12-15% (1,2).
Etiologickú rôznorodosť spôsobujú rôzne typy genetických defektov, detekcia ktorých si vyžaduje špecifické laboratórne metódy (tab.1). V ostatnom čase sme zaznamenali ich významný pokrok, týkajúci sa najmä rozvoja genetických diagnostických testov, ktoré majú priamy dopad na manažment komplexnej starostlivosti o pacientov a rizikových členov rodiny. Pre včasnú diagnostiku a prevenciu genetických ochorení je dôležité vzdelávanie a transfer poznatkov do praxe každého lekára. Potrebe začlenenia najnovších poznatkov z medicínskeho výskumu a genetiky do pregraduálneho a postgraduálneho vzdelávania sú venované osobitné príspevky na blížiacej sa konferencii AMEE (Association of Medical Education in Europe). Forsíruje sa dostupnosť vedomostí s cieľom rozpoznať genotypo-fenotypové korelácie najmä vo vzťahu k liečbe a celkovej zdravotnej starostlivosti (3). Iné asociácie a spoločnosti (ESHG, OECD) odporúčajú vzdelávanie v uvedených oblastiach vrátane genomiky a proteomiky zaradiť aj do mimoprofesného vzdelávania pracovníkov v zdravotníctve ako aj pre širokú laickú verejnosť. Primeraná úroveň vzdelania zbavuje neopodstatnených obáv z genetiky, ktorá je v 21.storočí neoddeliteľnou súčasťou liečebno-preventívnej starostlivosti.
S potešením možno konštatovať, že uvedené odporúčania u nás viac rokov akceptujeme. Otázky genetického testovania, algoritmy genetickej diagnostiky, správnej laboratórnej praxe, etiky a legislatívy v odbore sú náplňou pravidelných školiacich aktivít na SZU.
Zároveň sú pre nás ambíciou zaplniť priestor v tomto periodiku na pokračovanie, ktorého obsahom bude minimum genetických poznatkov. Prvú časť venujeme chromozómovým ochoreniam a prehľadu ich diagnostických metód.
I. Chromozómové choroby
Chromozómové anomálie pozorujeme ako zmeny na chromozómoch , ktoré môžu byť :
- vrodené (konštitučné)
- získané (v priebehu života napr. malígnym procesom v bunke).
Vrodené chromozómové anomálie spôsobujú zmenou počtu, alebo štruktúry chromozómov génovú nerovnováhu a upozornia na seba závažnou poruchou morfogenézy. Pre autozómové anomálie je typický výskyt VVCH spolu s mentálnou retardáciou (obr.1). Anomálie pohlavných chromozómov sprevádzajú poruchy rastu a somatosexuálneho vývinu a sú z klinického hľadiska menej závažné. Vyhľadávanie ich zvýšeného rizika sa uskutočňuje celoplošným prenatálnym biochemický skríningom ( sAFP a betaHCG ) u tehotných žien v rozmedzí 16-18 týždňa gravidity. Vrodené a získané chromozómové anomálie potvrdíme cytogenetickým vyšetrením pri ktorom sa stanoví karyotyp. Výskyt chromozómových chýb v populácii živorodených je cca 1% (2.4).
Diagnostické známky na klinickej úrovni
Na chromozómové ochorenia u novorodenca upozorňuje prítomnosť vrodených vývinových chýb (VVCH) , ktoré sú zastúpené v ich etiológii cca 5%. Signálmi pre chromozómovú anomáliu bývajú nevysvetliteľná polystigmatizácia, tonusové poruchy, rôzne patologické parametre zistené prenatálnym ultrazvukovým vyšetrením plodu ako sú: mikrocefalia, zhrubnutá nuchálna riasa, rastová retardácia a rôzne orgánové anomálie a iné. Neskôr to býva mentálna retardácia, zaostávanie rastu, pubertálneho vývinu, nástupu menštruácie a iné. V dospelosti sa konštitučná chromozómová anomália diagnostikuje skôr výnimočne. Ich záchyt pozorujeme pri vyšetrení párov pre poruchy fertility a reprodukcie v podobe anomálií pohlavných chromozómov, zriedkavých foriem malých gonozómových mozaík a vyvážených chromozómových prestávb.
Charakteristika a rozdelenie
Predstavujú odchylky od normálnej chromozómovej výbavy somatickej bunky, ktorá obsahuje 22 párov autozómov (1-22 ) a pár pohlavných chromozómov – gonozómov (XX, alebo XY). Najčastejšou príčinou vzniku aneuploidie je nondisjukcia, alebo patologické rozdelenie chromozómov v meióze, ktoré vzniká prezygoticky. Zriedkavo sú dôsledkom postzygotickej poruchy mitotického bunkového delenia. Tieto javy sú väčšinou náhodné, aj keď sa pripúšťa, že určité rodiny môžu mať sklon k nondisjuncii (asynchrónne delenie pri predčasnom delení centroméry). Len istá malá časť chromozómových anomáli vzniká zákonite v dôsledku vyvážených anomálií (prestavieb chromozómov), ktoré sa vyskytujú v populácii ich zdravých prenášačov s frekvenciou menej ako 0,2% (4)
Rozdelenie podľa (I a II) zohľadňuje typy chromozómov a konkrétne zmeny.
I. Rozdelenie podľa typu chromozómov
A./ AUTOZÓMOVÉ
B./ GONOZÓMOVÉ
II. Podľa typu zmien v počte a štruktúre chromozómov:
a/ numerické - odchýlky od normálneho počtu diploidnej sady chromozómov somatickej bunky. Môže ísť nadpočetný chromozóm z páru ( trizómia ), chýbajúci ( monozómia ), dva nadpočetné chromozómy z páru ( tetrazómia ) , násobky sady chromozómov ( triploidie ) a iné odchylky od normálneho počtu (aneuploidie ). Z autozómových anomálií k nim patrí trizómia 21 - Downov syndróm. Ide o najčastejšiu chromozómovú anomáliu, ktorej výskyt populácii je od od 1:750-1000 živorodených. Medzi ďaľšie zvyčajne neonatálne letálne trizómie patria Patauov ( trizómia 13 ) a Edwardsov ( trizómia 18 ) syndróm.
Trizómia môže byť voľná, náhodná forma s nízkym rizikom rekurencie, alebo translokačná. Táto mohla vzniknúť ako mutácia de novo, alebo dôsledkom vyváženej translokácie jedného z rodičov. Z gonozómových anomálií má najčastejší výskyt monozómia X, alebo Turnerov ( karyotyp 45,X0 ) a Klinefelterov syndróm ( karyotyp 47,XXY), ktoré sa zisťujú v čistej, alebo mozaikovej forme. Výskyt vybraných chromozómových anomálií je v tabuľke č.2.
b/ štruktúrové - charakterizuje zmena štruktúry chromozómu vizualizovateľné ako prestavby krátkeho (p) a / alebo dlhého ramienka (q) chromozómu. Patria sem chýbanie určitého úseku chromozómu (delécia), alebo zmnoženie (duplikácia) istého úseku chromozómu. Ďalej sú to premiestnenie časti chromozómu na iný (translokácia), alebo iné tvarové zmeny chromozómov ( prstencový chromozóm, izochromozóm). Príkladom autozómovej štruktúrovej anomálie je syndróm mačacieho plaču (Cri-de-Chat sy ), ktorý spôsobuje delécia úseku krátkeho ramienka chromozómu č.5 (obr.2) Zjednodušený zápis karyotypu u chlapca s týmto syndrómom je 46,XY, 5p-. Z gonozómových anomálií sa pomerne často vyskytuje prstencový chromozóm X - karyotyp 45,X r(X), alebo izochromozóm, ktorý sa u ženy manifestuje ako Turnerov syndróm (5). Submikroskopické zmeny, kryptické translokácie nie sú možné touto metódou obsiahnúť.
c/ mozaiky: predstavujú prítomnosť viacerých bunkových klonov s rozdielnou chromozómovou výbavou. Pozorujeme ich v bunkách ako rôzne chromozómové línie, nezriedka ako minoritné, s frekvenciou menšou ako 10%. Na ich detekciu je potrebné zhodnotiť väčšie množstvo mitotických figúr. Časté sú napríklad mozaikové formy Turnerovho syndrómu, Klinefelterovho syndrómu. U týchto pacientov teda nájdeme v bunkách karyotyp s normálnym a patologickým chromozómovým nálezom. Zápis karyotypu obsahuje viacero línii a začína sa zvyčajne najpočetnejšie zastúpenou. Mozaika Turnerovho syndrómu môže mať aj takýto nezvyčajný karyotyp ( 45,XO/46,XX/46,XY ). V tomto prípade prevažuje línia s chýbajúcim X chromozóm, prítomná je aj normálna a minoritná s prítomnosťou Y chromozómu. Existujú aj iné varianty s prstencovým, alebo s izochromozómom.
Genetické diagnostické testy
Chromozómové anomálie najčastejšie diagnostikujeme laboratórnymi technikami, ktoré poskytujú kompletnú analýzu karyotypu. V ostatnom čase sa klasické metódy identifikácie chromozómov dopĺňajú o nové zobrazovacie metódy, ktorými sa odhaľujú predtým nepoznané prestavby na submikroskopickej úrovni (5,6).
Klasická metóda cytogenetického vyšetrenia je založená na analýze metafázových chromozómov získaných mitotickým delením kultivovaných lymfocytoch, ktoré sa farbia konvenčne a prúžkovacími metódami (C, G, R, Q). Detekuje numerické a štruktúrové anomálie na úrovni do 550 bandov. Vyššiu rozlišovaciu schopnosť dosiahneme metódou HRT (High resolution method), kde sa hodnotia dlhšie prometafázické chromozómy. Vyšetrenie karyotypu touto metódou vyžaduje odbornú skúsenosť a pre jej náročnosť ju nahrádzajú iné modernejšie metódy farebnej cytogenetiky (6).
Klasická cytogenetika sa rutinne využíva v diagnostike konštitučných chromozómových anomálií u pacientov s vrodenými vývinovými chybami (VVCH), mentálnou retardáciou ( MR ), poruchami rastu a pohlavného vývinu, alebo pri opakovaných spontánnych potratov. V neposlednej rade aj v prenatálnej diagnostike u plodu, ktorá sa uskutočňuje po stanovení ich rizika klinickým genetikom. Gonozómové anomálie, najmä v nizkopercentnej mozaikovej forme (Turnerov, Klinefelterov syndróm) sa môžu výnimočne diagnostikovať až pri poruchách reprodukcie v dospelom veku. Klasická metóda umožní záchyt štruktúrových anomálií a mnohonásobných chromozómových prestávb, ktoré sú typické pre syndrómy chromozómovej instability s rizikom malignity. Príkladom sú Fanconiho anémia, Ataxia teleangiektázia, Nijmegenský syndróm a iné. Manifestujú sa zvýšenou lomivosťou chromozómov. Najčastejšie sa pri týchto syndrómov zistí instabilná chromozómová translokácia 7/14, spolu s inými štruktúrovými zmenami a figúrami ( gapy, breaky, triradiály, kvadruradiály), ktoré bývajú v rôznom percentuálnom zastúpení (obr.3).
Fluorescenčná in situ hybridizácia ( FISH ) metóda používa metódy molekulovej cytogenetiky. Umožní diagnostiku chromozómových prestávb na submikroskopickej úrovni ( < 800 bandov ), ktoré nie sú vizualizovateľné klasickou technikou . Ide najmä o mikrodelečné a mikroduplikačné syndrómy a pomáha tiež odhaliť nízkopercentné mozaiky. Princípom je detekcia signálov po hybridizácii pacientovej chromozómovej DNA so špecifickými sondami (centromerickými, celochromozómovým, alebo lokusovo špecifickými) použitými podľa potreby (obr.4 ). Centromerické sondy sa používajú na zisťovanie numerických chromozómových chýb s dôkazom prítomnosti centromér, telomerických sekvencií a obsahu heterochromatínu. Celochromozómové sondy hybridizujú so svojim homológom pozdĺž celého chromozómu. Sú vhodné na diagnostiku štruktúrových anomálií chromozómov ako sú translokácie, delécie, inverzie. Lokusovo špecifické, alebo génové sondy hybridizujú do oblasti hľadaných konkrétnych sekvencii. Tento typ sond, veľkosti cca 150 kb, sa využíva k diagnostike mikrodelečných syndrómov ako sú napríklad najznámejšie z nich ( Praderov-Williho, Angelmanov, Di-Georgov, Wiliamsov-Beuerenov). Výhodou tejto metódy je hodnotenie signálov na väčšom počte chromozómov aj bunkových jadier. Použitie FISH a iných DNA metód detekujúcich sekvencie v oblasti SRY chromozómu Y umožňuje pri mozaikových formách Turnerovho syndrómu vyhľadávať pacientky s rizikom gonadoblastómu.
Kombinácia klasických a molekulovo cytogenetických metód sa využíva v onkogenetike pri diagnostike a liečbe hemoblastóz, vrátane monitorovania reziduálnej choroby a postransplantačných stavoch. Chronickú myeloickú leukémiu potvrdzuje výskyt chromozómu Philadelphia, ktorý vzniká v dôsledku translokácie medzi dlhými ramenami
Iné modifikované techniky
CGH - Komparatívna genómová hybridizácia je založená na porovnávaní dvoch fluorescenčne značených vzoriek DNA ( referenčnej a pacientovej), ktoré hybridizujú s normálnymi metafázovými chromozómami. Pacientová testovaná DNA je značená zeleným flurochrómom a referenčná vzorka ( DNA od zdravého jedinca s normálnym karyotypom ) sa označuje červeným. V pomere 1:1 sa obidve nechajú hybridizovať na preparáte s normálnymi chromozómami. Nerovnováhu v testovanej vzorke zistíme vyhodnotením pomeru intenzity zelenej a červenej fluorescencie pomocou špeciálneho softwaru. Využíva sa v nádorovej cytogenetike na skrínovanie chromozómovej nerovnováhy. Metóda však presnejšiu identifikáciu prestavby neumožňuje.
Multicolor FISH- mnohonásobná farebná fluorescentná in situ hybridizácia K detekcii zmien sa používa zmes rozdielne značených sond 5 fluorochrómami a ich vzájomnou kombináciou, čím sa docieli rozlíšenie všetkých chromozómov. Na vyhodnotenie je potrebná digitálna zobrazovacia mikroskopia s filtrami, CCD kamera a počítačový software k analýze obrazu. Na základe fluorochrómovej kompozície sa každému chromozómu určí tzv.pseudofarba..Táto metóda sa používa na identifikáciu zložitejších translokácií a prestavieb medzi viacerými chromozómami. Neumožňuje detekciu vnútrochromozómových zmien typu inverzií a malých delécií.
SKY - spektrálne karyotypovanie je variantom mnohofarebnej FISH, každému chromozómu je tiež pridelená pseudofarba. Kombinuje snímanie obrazu trojakým filtrom CCD kamerou s Fourierovou spektroskopiou a príslušným počítačovým programom.
mBAND - metóda mnohonásobného pruhovania - je založená na podobnom princípe ako FISH. Podstatou m.-pruhovania je označenie jedného chromozómu viacerými značenými sondami. V kombinácii sa tiež používa 5 fluorochrómov. Každá sonda hybridizuje s inou časťou chromozómu. Na základe hybridizačných signálov dochádza k tvorbe priečnych farebných pruhov po celej dĺžke chromozómu.
Záver: Zlatým štandardom klinickej cytogenetiky je vyšetrenie karyotypu klasickou metódou. S pribúdajúcimi dôkazmi o výskyte submikroskopických chromozómových zmien, kryptických prestávb modernými laboratórnymi technikami sa zvyšuje pravdepodobnosť odhaliť kauzálnu súvislosť s etiologicky neobjasnenou mentálnou retardáciou a polystigmatizáciou.
Literatúra:
1. Smith, C. J., Donnai , D.: Human malformation. In: Emery and Rimon´s Principles and Practice of Medical Genetics. 3.vyd. New-York: Churchill Livingstone, 1998, s. 687 - 696.
2. Thompson and Thompsonová : Genetics in medicine, W.B.Saunders company, 6-th Ed., 2001, s.443.
3. Internetové adresy: www.amee.org
4. VOGEL, F., MOTULSKY, A.G. Human Genetics. 3. vyd .Berlin-Heidelberg: Springer - Verlag , 1997, s 370 -376 .
5. Izakovič V. a kolektív: Cytogenetika v klinickej endokrinológii., Osveta Martin, 1972, 320 s.
6. Černáková I., Ďurovčíková D., Brozmanová, M.: De novo tandem duplication 15q21-26 identified by FISH. Cytogenet.Cell. Genet.,Vol.85,1999, Suppl.1., s.144
Tab.1 Geneticky podmienené patologické stavy
Chromozómové ( 0,6 – 0,9 %)
Monogénové ( 0,8% )
AD, AR, X-viazané
Multifaktoriálne ( polygénne dedičné)
a/ izolované VVCH ( 3-5% )
b/ choroby dospelého veku ( 5% )
Genetické poruchy somatických buniek
Mitochondriálne dedičné
____________________________________________
Celkový výskyt v populácii živorodených : 12 -15%
Tab. 2 Populačná frekvencia chromozómových syndrómov
( na 1000 živorodených )
Trizómia 21 (Downov ) |
1,5 |
Trizómia 18 (Edwardsov ) |
0,12 |
Trizómia 13 (Patauov) |
0,07 |
47,XXY (Klinefelterov) |
1,5 |
45,X (Turnerov ) |
0,4 |
XYY sy |
1,5 |
XXX sy |
0,65 |
Komentáře
Přehled komentářů
Men dating men participation tenderness, consistency, and the belle of relationships in their own unique way.
https://analxxx.one/tags/licking/
In a everyone that embraces diversity and inclusivity, same-sex relationships have ground their place. Men who fixture men navigate the joys and challenges of edifice relevant connections based on authenticity and joint understanding. They hallow charity while overcoming societal expectations, stereotypes, and discrimination.
https://ca3h.com/tags/bear-bareback/
Communication and fervent intimacy disport oneself a crucial role in their relationships, fostering assurance and deepening their bond. As people progresses towards conformity, it is important to distinguish and respect the care shared between men dating men, embracing their together experiences and contributions to the tapestry of human connections.
Exploring the Hypnotic of Dating: Connections, Nurturing, and Idea
(Cyharlesspuse, 4. 5. 2024 17:08)
Dating is a go abroad that encompasses the magic of vulnerable ally, offensive growth, and overpowering discoveries. It is a process toe which individuals explore maudlin possibilities, getting to be acquainted with each other on a deeper level. Dating allows people to appropriate experiences, truck ideas, and father consequential connections.
https://thetittyfuck.com/videos/12614/how-to-resist-my-hot-yoga-mom/
In the realm of dating, whole encounters a dissimilar kind of emotions. There's the exhilaration of get-together someone new, the intuition of a first swain, and the thrill of discovering garden interests and shared values. It is a stretch of vulnerability and self-discovery as individuals open themselves up to the potentiality of love and companionship.
https://thetittyfuck.com/videos/8076/watch-these-stunning-girls-have-hot-lesbian-sex-in-an-elevator/
Effectual communication lies at the heart of dating, facilitating accord and appropriateness between two people. It involves running listening, up symbol, and empathy, creating a space object of trustworthy dialogue. Through communication, individuals can inquire their compatibility, interchange thoughts and dreams, and assemble a foundation of trust.
Гид по Калининграду: лучшие маршруты и достопримечательности
(Scottjandy, 29. 4. 2024 12:40)
Здравствуйте!
Открыть для себя Калининград и его уникальное окружение в полной мере возможно благодаря нашим индивидуальным экскурсиям. Мы - команда опытных и аккредитованных гидов, специализирующихся на проведении экскурсий по Калининградской области. Наша услуга предлагает нечто более уникальное, чем обычные туры. Мы нацелены на создание персонализированных программ, которые соответствуют интересам каждого нашего клиента. Благодаря нашим маршрутам, вы сможете погрузиться в атмосферу удивительного Калининграда и его исторических достопримечательностей. Мы предоставляем комфортные автомобили для перемещения по городу и его окрестностям. Наша команда гидов обладает богатым знанием истории, культуры и архитектуры региона. Мы стремимся к тому, чтобы каждая экскурсия стала для вас незабываемым опытом. Помимо основных достопримечательностей, мы также предлагаем маршруты, выходящие за пределы обычных туристических маршрутов. Посетите уникальные места, которые редко попадают в стандартные туры. Если вы хотите узнать больше о наших экскурсиях или забронировать место, посетите наш сайт по ссылке: TopKaliningrad.ru. Там вы найдете подробную информацию о наших услугах и сможете связаться с нами для организации вашей незабываемой поездки по Калининграду и его окрестностям.
Калининград ночной экскурсия
гиды Калининграда индивидуальные экскурсии
экскурсии по Калининградской области
гид по Калининграду и Калининградской области
индивидуальная экскурсия в Калининграде
Калининград экскурсии по городу индивидуальные
Удачи и хорошего визита в Калининград!
Гид по Калининграду: индивидуальные экскурсии с учетом ваших интересов
(Scottjandy, 29. 4. 2024 11:33)
Привет всем!
Индивидуальные экскурсии по Калининградской области отличаются высокой степенью персонализации, что делает ваше путешествие по-настоящему уникальным и запоминающимся. В отличие от типовых туров, где каждый участник следует общему маршруту, индивидуальные экскурсии позволяют вам создать собственный опыт путешествия, адаптированный под ваши интересы, предпочтения и темп.
Одним из ключевых преимуществ индивидуальных экскурсий является возможность выбора гида в соответствии с вашими потребностями. Это означает, что вы можете подобрать эксперта, который наилучшим образом подходит для вашего типа путешествия: будь то глубокие знания истории и архитектуры или живой рассказ о местных обычаях и культуре. Такой индивидуальный подход обеспечивает более насыщенный и интересный опыт общения с гидом.
Еще одним преимуществом индивидуальных экскурсий является гибкий график и возможность регулировать темп путешествия в соответствии с вашими потребностями. Вы сами можете определить длительность пребывания на каждой достопримечательности, а также решить, когда и где делать перерывы и остановки. Это позволяет вам не только более глубоко исследовать интересующие вас места, но и полностью насладиться путешествием без стресса от суеты и ограничений.
Наши индивидуальные экскурсии по Калининградской области предлагают разнообразные варианты маршрутов и программ, позволяющих каждому путешественнику найти что-то по своему вкусу. Мы гарантируем высокое качество обслуживания и незабываемые впечатления от вашего путешествия.
Хотите узнать больше о наших индивидуальных экскурсиях по Калининградской области? Посетите наш сайт, чтобы ознакомиться с доступными маршрутами и забронировать свое путешествие уже сегодня.
Перейдите на наш сайт - https://topkaliningrad.ru , чтобы начать планирование вашего незабываемого приключения.
экскурсии из Калининграда на Куршскую косу индивидуальные
индивидуальная экскурсия Калининград
Калининград экскурсия по городу
экскурсии по Калининграду
частные гиды по Калининградской области
индивидуальная обзорная экскурсия по Калининграду
Удачи и хорошего визита в Калининград!
Не теряйте клиентов из-за ошибок на сайте! Мы поможем вам решить эту проблему
(Владислав, 28. 4. 2024 21:57)
Меня зовут Владислав, и я представляю команду Web Hero. Мы обнаружили несколько технических недочетов на вашем сайте, которые могут отталкивать ваших клиентов.
Наша команда готова приступить к исправлению этих проблем немедленно, чтобы ваш сайт работал безупречно.
Давайте обсудим возможности сотрудничества и наши предложения по улучшению вашего веб-ресурса. Просто оставьте заявку на нашем сайте: wbhr.ru, или свяжитесь со мной напрямую по адресу sale.tp1@wbhr.ru.
С уважением,
Владислав
Web Hero
Rank your fazos.estranky.cz #1 in Google
(Stevenses, 27. 4. 2024 13:51)
Hello, fazos.estranky.cz
We can help you rank your website number 1 in Google which would make your website a lead machine for your business.
We offer the following services with a suitable price.
1. SEO Services
2. Enterprise SEO Services
3. Local SEO Services
4. Google Local Services Ads Management
5. Page Speed & Core Web Vitals Optimization
Let me know if you are interested, I will send you our SEO Packages and price list.
details: https://drive.google.com/file/d/1yPWdyHUdc3VGqLr2FI0p_11sM5Pm0Edc/
Best Regards,
Dessen Peters
Business Development Executive
Men Dating Men: Celebrating Love and Connection
(Albertanodo, 26. 4. 2024 12:04)
Men dating men experience tenderness, connecting, and the stunner of relationships in their own unique way.
https://erhe.me/tags/gay-group-sex/
In a life that embraces diversity and inclusivity, same-sex relationships suffer with found their place. Men who obsolete men sail the joys and challenges of erection meaningful connections based on authenticity and joint understanding. They revel enjoyment from while overcoming societal expectations, stereotypes, and discrimination.
https://twinkporn.one/tags/latino/
Communication and heartfelt intimacy play a essential role in their relationships, fostering positiveness and deepening their bond. As society progresses toward justice, it is important to acknowledge and particular the care shared between men dating men, embracing their incomparable experiences and contributions to the tapestry of human connections.
Поставки редких металлов и хим. соединений с ними.
(Rebeccadrene, 25. 4. 2024 20:10)
На портале PKP-RMS - https://pkp-rms.ru, вы сможете выбрать из более чем 1000 товаров. Наша компания - крупнейший дистрибьютор на рынке России, специализирующийся на поставке высококачественных материалов как для производственных, так и исследовательских целей. Наш каталог товаров - это беспрецедентный источник информации о товарах для вашего бизнеса.
Наши товары:
- Барий нитрит гидрат: https://pkp-rms.ru/catalog/neorganicheskie-soedineniia/barii-nitrit-gidrat/
- Литий бромид: https://pkp-rms.ru/catalog/neorganicheskie-soedineniia/litii-bromid-2/
- Калий: https://pkp-rms.ru/catalog/metally/kalii-1/
- Рений (VII) оксид: https://pkp-rms.ru/catalog/neorganicheskie-soedineniia/renii-vii-oksid-1/
- Лантан (III) нитрат гексагидрат: https://pkp-rms.ru/catalog/neorganicheskie-soedineniia/lantan-iii-nitrat-geksagidrat/
Exploring the Miraculous of Dating: Connections, Nurturing, and Determining
(Cyharlesspuse, 22. 4. 2024 17:52)
Dating is a junket that encompasses the spell of good samaritan bearing, slighting growth, and exciting discoveries. It is a dispose of through which individuals search maudlin possibilities, getting to know each other on a deeper level. Dating allows people to part experiences, truck ideas, and fashion consequential connections.
https://erhe.me/tags/hard-fast-fuck/
In the realm of dating, one encounters a distinctive string of emotions. There's the exhilaration of get-together someone new, the intuition of a in the first place escort, and the quivering of discovering stock interests and shared values. It is a stretch of vulnerability and self-discovery as individuals open themselves up to the plausibility of regard and companionship.
https://squirting.world/tags/public/
Effectual communication lies at the will of dating, facilitating accord and connection between two people. It involves acting listening, up expression, and empathy, creating a range for veritable dialogue. Through communication, individuals can enquire into their compatibility, the board thoughts and dreams, and develop intensify a foundation of trust.
порча на расставание-заказала у 1mag.cmag666.ru в Литве - по фото
(MichaelWew, 20. 4. 2024 16:32)
порча на расставание-сделала у 1mag.cmag666.ru
Выражаю глубокую благодарность Светлане с сайта 1mag.cmag666.ru за ее профессионализм и внимание к моим проблемам. Долго колебалась перед тем, чтобы обратиться за помощью, но уже с первых минут общения с Светланой появилось чувство уверенности и понимания, что я на правильном пути. Ее поддержка и теплая, доброжелательная атмосфера помогли мне преодолеть сомнения и начать работу над решением моих вопросов. Я ощущала, что она искренне заинтересована в моем благополучии и готова помочь в любой ситуации. Светлана была на связи на протяжении всего процесса, всегда готова была подсказать и ответить на мои вопросы. Я благодарна ей за ее профессионализм, терпение и поддержку. Рекомендую Светлану всем, кто ищет надежного специалиста и поддержку в трудные моменты.
-отзывы - порча на расставание
-порча на расставание-сделала у 1mag.cmag666.ru
-как действует - порча на расставание
-поможе ли порча на расставание
-порча на полную импотенцию отзывы
-что такое наследственная порча зорин отзывы
-отзывы о приворотах порчах
Exploring the Miraculous of Dating: Connections, Advancement, and Discovery
(Cyharlesspuse, 14. 4. 2024 13:03)
Dating is a journey that encompasses the magic of good samaritan bearing, slighting growth, and far-out discoveries. It is a take care of through which individuals explore maudlin possibilities, getting to be acquainted with each other on a deeper level. Dating allows people to appropriate experiences, truck ideas, and create deep connections.
https://sexyfatmature.net/videos/51451/bbw-lovers-goddess-shar-shake-chug-and-belly-play/
In the monarchy of dating, a person encounters a diverse string of emotions. There's the exhilaration of convocation someone contemporary, the intuition of a beginning fixture, and the thrill of discovering stock interests and shared values. It is a time of vulnerability and self-discovery as individuals open themselves up to the potentiality of regard and companionship.
https://hentai0day.com/videos/1596/cartoon-porn-3d-porn/
Effective communication lies at the heart of dating, facilitating understanding and appropriateness between two people. It involves running listening, up symbol, and empathy, creating a gap representing veritable dialogue. Through communication, individuals can tour their compatibility, interchange thoughts and dreams, and assemble a groundwork of trust.
Windows 10 ISO Full Direct Link - HighSpeed
(Download Windows 10, 13. 4. 2024 12:51)
At present, there are still many people who prefer using Windows 10 Pro than upgrading to Windows 11. When an operating system already has everything necessary for one to work with, there is little to no reason for upgrade. As a matter of fact, some users consider Windows 10 Pro as the best version Microsoft has ever made and hence they are reluctant to replace it with the latest version.
Still, just like any other Windows versions ever released by Microsoft, Windows 10 Pro isn’t completely without problems. There have been a lot of issues and some of them have affected many users’s experiences significantly in using the operating system.
Microsoft Edge is the recommended browser in Windows 10 Pro offering a simple yet sleek interface alongside a slew of features that makes browsing the web feels much more convenient than when you use Internet Explorer. It is built based on the engine that powers Google Chrome browser and yet many users believe that Microsoft Edge is faster and lighter.
Despite being an older version, Windows 10 Pro has an arguably better Start Menu than Windows 11. It might look less beautiful but it is more functional. The fact that there are plenty tutorials on how to relocate the start menu to the left of the taskbar in Windows 11 is enough of a proof that new design isn’t always better than the old one, especially if the changes is too different from the past version.
There are at least two features in Windows 10 Pro that can save your eyes. The first one is dark theme that takes effect nearly everywhere including File Explorer. The second is Night Light. While the dark theme can protect your eyes from being blinded by the bright color of the light theme, the Night Light reduces the blue light which is believed to be a prominent factor in harming one’s sight.
Another mundane feature yet so helpful is the Quick Access section in File Explorer. The files that you were last working on are listed there automatically by Windows, so you can resume whatever you were working on quickly. However, while there are users who find this useful, there also others who considers it as a privacy risk and therefore disable it.
The clipboard manager, the one that has been revamped, is extremely useful in copying and pasting items. It stores the history of copied items. When you need to paste the same item, instead of searching it and copying it again, you can just pick it up from the history. Better yet, the clipboard content can be synced across your computers via the cloud. For users who copy paste text a lot, this feature alone would be a great boost to productivity.
Windows 10 Pro ISO Free Download
Windows 10 Pro is jam-packed with tons of features that are not only very useful but also easy to use. And there are still advanced features that power users can utilize to do certain tasks even more efficiently. All in all, Windows 10 Pro fits both casual and power users. You can click the link below to download Windows 10
Link :
Download Windows 10 : https://docste.com/download-windows-10-iso
Create USB Bootable : https://docste.com/create-bootable-usb-drive-of-windows-10-and-11-using-rufus
Get your bon...
(StevenRoona, 13. 4. 2024 9:11)
Top internet casіos!
Get Bigs bоnus for frее singup
https://tinyurl.com/3wr7weru
Get Big bon...
(StevenRoona, 12. 4. 2024 14:49)
Top online casіos!
Get Big bоnus for frее singup
https://tinyurl.com/yrnh2a3x
Men Dating Men: Celebrating Adulation and Joint
(Albertanodo, 12. 4. 2024 9:10)
Men dating men sample get a bang, connecting, and the stunner of relationships in their own incomparable way.
https://twinkporn.one/sites/thustin69/
In a world that embraces diversity and inclusivity, same-sex relationships have develop their place. Men who ancient men sail the joys and challenges of structure meaningful connections based on authenticity and mutual understanding. They hallow enjoyment from while overcoming societal expectations, stereotypes, and discrimination.
https://sexyfatmature.net/categories/japanese/
Communication and heartfelt intimacy pleasure a essential role in their relationships, fostering reliability and deepening their bond. As system progresses towards equality, it is noted to recognize and respect the angel shared between men dating men, embracing their together experiences and contributions to the tapestry of anthropoid connections.
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92
Men Dating Men: Celebrating Harmony and Bearing
(Albertanodo, 5. 5. 2024 11:54)